跟客户讲我们在发出之前做过支原体和细菌检测的,客户反应细胞里面有小黑点,是细胞代谢产物不规则布朗运动,不是细菌,如果是细菌污染,细胞培养基颜色过夜就会发黄变浑浊,菌会爆发式的生长,并且显微镜中看到的菌是没有规律且快速的游动,另外如果是支原体污染在400倍显微镜下是看不到的,所以让客户不要担心细胞没有污染,细胞里面的小黑点主要是运输过程中细胞碎片和生长的代谢产物,让客户不用担心,换液时用PBS多冲洗几次,传代换新的培养瓶,底面就会越来越干净的
细胞经过运输后,部分细胞由于温度变化或者剧烈碰撞死亡破碎形成碎片,是正常现象。可以在消化完成后加完全培养基终止消化,混匀细胞,收集细胞悬液900-1000rpm(约150g)离心3min,弃上清。再加5ml PBS重悬细胞,再离心后,用完全培养基重悬接种到新的培养皿。第二次PBS重悬是为了去除碎片,如果平时碎片比较少,传代时可以省略PBS重悬的步骤;如果碎片很多,建议PBS多洗几次。
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