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细胞传代并培养几天后,细胞未明显增殖,要如何处理?

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婷婷 2020-10-21 16:48 评论( 0 ) 浏览( 218 )

准备:低密度的细胞培养皿一个,15ml无菌离心管,胰酶,新培养皿,完全培养基

步骤:①显微镜下观察传代4天后的细胞状态;

②转移至操作台内进行细胞传代,先用PBS清洗细胞碎片,加入2ml胰酶,显微镜下观察有细胞脱落或细胞皱缩时,吸走1.5ml胰酶,剩余0.5ml胰酶继续消化至细胞完全脱落皿底;

③终止消化后800rpm,离心3分钟;

④重悬细胞沉淀至新的培养皿中,额外添加5%胎牛血清后转移至培养箱内培养;

⑤过夜后观察细胞状态有无好转及观察细胞增殖现象。

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