北纳生物-河南省工业微生物菌种工程技术研究中心

乳酸菌的生理生化鉴定

发布时间:2021-10-11 16:29 作者:北纳生物编辑-陈丹

乳酸菌(lactic acid bacteria,LAB)是一类能利用可发酵碳水化合物产生大量乳酸的细菌的统称。这类细菌在自然界分布极为广泛,具有丰富的物种多样性,至少包含18个属,共200多种。   除极少数外,其绝大部分都是人体内必不可少的、且具有重要生理功能的菌群,广泛存在于人体的肠道中, 接下来小编给大家简单介绍一下乳酸菌的生理生化鉴定方法。

①过氧化氢酶试验

在产细菌素菌株和指示菌菌株的MRS固体平板上分别取适量菌体涂于干净载玻片,滴加15%H 2 O2 溶液。有气泡产生为阳性反应,无气泡产生为阴性反应。

②糖醇发酵试验

不同的糖、醇分别按1%或0.5%的比例加入PY 培养基中,同时加入0.16g/L溴甲酚紫溶液作产酸指示剂。分别将产细菌素菌株和指示菌菌株按1%接种量接种,37℃培养1~2d,培养液变为黄色则表示产酸,确定为阳性反应。

③淀粉水解试验

将产细菌素菌株和指示菌菌株分别按1%接种量接种到含有0.5%可溶性淀粉的PY培养基中,37℃培养1d~2d。向培养液中加入几滴卢戈氏碘液,如不显色表示淀粉水解阳性反应,显蓝黑色或蓝紫色表示淀粉水解阴性反应。

④精氨酸产氨试验

在PY培养基中加入精氨酸溶液,调pH至7.0,灭菌后取新鲜液体培养物2 滴加入精氨酸水解培养基内,将产细菌素菌株和指示菌菌株分别按1%接种量进行接种,同时接种于不含精氨酸的培养基作对照,分别于37℃培养72h。取少量培养液于比色盘中,加奈氏试剂数滴,产生黄色沉淀且强于不添加精氨酸的对照时才能确定为阳性反应。

⑤从葡萄糖产气试验

向PY培养基中加入3%葡萄糖和0.5mL Tween80,再添加6g琼脂和0.16g/L溴甲酚紫1.4mL,做成软琼脂柱。将产细菌素菌株和指示菌菌株的新鲜培养物穿刺接种到软琼脂柱,37℃培养72h,指示剂变黄表示产酸,琼脂柱内产生气泡证明产气。

⑥生长试验

将产细菌素菌株和指示菌菌株分别接种至MRS固体培养基斜面,分别置于15℃和45℃,观察菌体是否能够生长。

⑦pH 耐受性试验

将产细菌素菌株和指示菌菌株分别以1%接种量接种在pH4.0 和pH9.0 的MRS液体培养基中,观察菌体是否能够生长。

⑧耐盐性试验

将产细菌素菌株和指示菌菌株分别按1%接种量接种于含6.5% 和10% NaCl 的MRS液体培养基中,观察菌体生否能否生长。

相关链接:乳酸菌溴甲酚紫溶液,细菌素菌株,过氧化氢酶精氨酸北纳生物

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