人肺癌细胞BNCC337696|肿瘤细胞|北纳生物

基本信息
资源编号	BNCC337696
资源名称	人肺癌细胞
种属	A549
类型	贴壁生长
形态	CM7-1培养液中，贴壁，上皮细胞样，多角形
分离基物	│该细胞系是1972年由GiardDJ通过肺癌组织移植培养建系的，源自一位58岁的白人男性。
提供形式	复苏形式：T25培养瓶1瓶；或者冻存形式：2ml冻存管2支，干冰费另计。
安全等级	1
模式菌株	未知
应用领域	A549能通过胞苷二磷脂酰胆碱途径合成富含不饱和脂肪酸的卵磷脂；角蛋白阳性。

培养方法
培养基	90%F-12K+10%FBS
传代方法	将旧培养液吸除，PBS清洗两遍后，加入2mL（/100mm皿/T25瓶）胰酶（0.25%Trypsin+0.02%EDTA），在显微镜下观察，期间禁止摇晃培养皿，细胞刚有脱落时，吸除大部分胰酶，留约0.5mL，移至培养箱消化，约4min取出。传代用6mL CM1-1培养液终止消化，轻轻吹打均匀细胞，后可分3~6皿培养；
生长条件	37℃，5%CO2，CM7-1培养液。CM7-1培养液：90%F-12K+10%FBS。F-12K：F-12K培养液。
存储条件	冻存则用6mL冻存液（90%FBS+10%DMSO）终止消化，吹打均匀，分为6支冻存管，用程序降温盒于-80℃冻存，过夜转移至液氮中保存。_x000d_

产品详情

A549 人肺癌细胞

贴壁，上皮细胞样

编号： 337696

培养：37℃，5%CO₂ CM7-1 培养液

产品形式： 2mL 冻存管 × 2 支、或 T25 × 1 瓶；

安全等级：一级，安全柜或超净台操作

收货须知：收货当天发现异常，请在 24 小时内及时联系客服，逾期视为收货良好；冻存管形式，收货后及时置于-80℃冰箱保存，若长时间不使用，应过夜转移至液氮保藏；T25 形式，收货后先培养瓶原装置于培养箱静养 4h，然后再对细胞进行常规操作。复苏时每管一次用完不得留存，复苏后传一代，即可正常使用。请严格按照本说明操作，否则造成细胞失活等情形，不予提供补发服务。

培养条件：37℃，5%CO₂，CM7-1 培养液。CM7-1 培养液：90%F-12K+10%FBS。F-12K：F-12K 培养液。

复苏步骤：①新制 100mm 平皿 1 个，含 12mL 上述培养液；

②冻存管从液氮或-80℃中取出，37℃水浴 1~2min,待完全溶解后尽快移入安全柜复苏；

③用无菌吸管吸取溶解液打入新制平皿中，顺时针摇匀；

④放入（37℃，5%CO₂）培养箱中，过夜换液，2-4 天长满。

传代/冻存：将旧培养液吸除，PBS 清洗两遍后，加入 2mL（/100mm 皿/T25 瓶）胰酶（0.25%Trypsin+0.02%EDTA），在显微镜下观察，期间禁止摇晃培养皿，细胞刚有脱落时，吸除大部分胰酶，留约 0.5mL，移至培养箱消化，约 3min 取出。传代用 6mL CM7-1 培养液终止消化，轻轻吹打均匀细胞，后可分 3~6 皿培养；冻存则用 3mL 冻存液（90%FBS+10%DMSO）终止消化，吹打均匀，分为 3 支冻存管，用程序降温盒于-80℃冻存。

复苏质量记录：根据复苏要求，对以上细胞株进行复苏，记录结果如下：

项目	质量标准	复苏记录
复活性	12h 贴壁，90h 长满 80%	过夜 12h 后观察贴壁，90h 密度达 80%
细胞形态	贴壁，上皮细胞样	CM7-1 培养液中，贴壁，上皮细胞样，多角形
附图
结论	复活性好，且细胞形态无异常，合格