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人胚肾细胞-菌种及细胞-北纳生物

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基本信息
资源编号 BNCC100530
资源名称 人胚肾细胞
种属 293T
类型 贴壁生长
形态 CM1-1培养液中,贴壁,上皮细胞样,多角形,紧密排列
分离基物 胚肾;5型腺病毒及SV40转化;女性
提供形式 复苏形式:T25培养瓶1瓶;或者冻存形式;2ml冻存管2支,干冰费另计。
安全等级 1
模式菌株 未知
应用领域 表达SV40大T抗原,可用于转染和作为包装细胞;用于瞬时转染时可高表达AP融合蛋白。293细胞是转染腺病毒E1A基因的人肾上皮细胞系,293T细胞由293细胞派生,同时表达SV40大T抗原,含有SV40复制起始点与启动子区的质粒可以复制。@2017
培养方法
传代方法 将旧培养液吸除,PBS清洗两遍后,加入6mL(/100mm皿)胰酶,在显微镜下观察,期间禁止摇晃培养皿,细胞刚有脱落时,则吸除大部分胰酶,留约0.5mL,移至培养箱消化,约2min取出。传代用12mL CM1-1培养液终止消化,轻轻吹打均匀细胞,后可分3~6皿培养;
生长条件 37℃,5%CO2,CM1-1培养液。CM1-1培养液:90%DMEM-H+10%FBS。DMEM-H:DMEM高糖培养液,含谷氨酰胺,含丙酮酸钠。
生长特性 细胞贴壁不牢,加胰酶消化时,细胞会成块脱落,过一会就要把多余的胰酶吸走。培养过程中增殖缓慢,细胞密度大概在70%左右。
存储条件 冻存则用6mL冻存液(90%FBS+10%DMSO)终止消化,吹打均匀,分为6支冻存管,用程序降温盒于-80℃冻存,过夜转移至液氮中保存。
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