资源编号 | BNCC100015 |
资源名称 | 人整合SV40基因的乳腺上皮细胞 |
种属 | HBL-100 |
类型 | 贴壁生长 |
形态 | CM1-1培养液中,贴壁,上皮样细胞,多角形 |
分离基物 | 该细胞由E.V.Gaffney及其同事从一位没有乳癌家族史的供者乳汁中建立,培养出来的细胞染色体组型在第7代时就不正常; |
提供形式 | 复苏形式:T25培养瓶1瓶;或者冻存形式:2ml冻存管2支,干冰费另计。 |
安全等级 | 1 |
模式菌株 | 未知 |
应用领域 | 电镜照片显示有微丝、张力原纤维和桥粒;Southern转移表明有整合型SV40病毒基因,不可以当作正常细胞。 |
传代方法 | 将旧培养液吸除,PBS清洗两遍后,加入6mL(/100mm皿)胰酶,在显微镜下观察,期间禁止摇晃培养皿,细胞刚有脱落时,则吸除大部分胰酶,留约0.5mL,移至培养箱消化,约2min取出。传代用12mL CM1-1培养液终止消化,轻轻吹打均匀细胞,后可分3~6皿培养; |
生长条件 | 37℃,5%CO2,CM1-1培养液。CM1-1培养液:90%DMEM-H+10%FBS。DMEM-H:DMEM高糖培养液,含谷氨酰胺,含丙酮酸钠。 |
存储条件 | 冻存则用6mL冻存液(90%FBS+10%DMSO)终止消化,吹打均匀,分为6支冻存管,用程序降温盒于-80℃冻存,过夜转移至液氮中保存。 |
产品详情
HBL-100 人整合 SV40 基因的乳腺上皮细胞
贴壁,上皮细胞样
编号: 100015
培养:37℃,5%CO2 CM1-1 培养液
产品形式: 2mL 冻存管 × 2 支、或 T25 × 1 瓶 ;
安全等级: 一级,安全柜或超净台操作
收货须知:收货当天发现异常,请在 24 小时内及时联系客服,逾期视为收货良好;冻存管形式,收货后及时置于-80℃冰箱保存,若 长时间不使用,应过夜转移至液氮保藏;T25 形式,收货后先培养瓶原装置于培养箱静养 4h,然后再对细胞进行常规操作。复苏时每 管一次用完不得留存,复苏后传一代,即可正常使用。请严格按照本说明操作,否则造成细胞失活等情形,不予提供补发服务。
培养条件:37℃,5%CO2,CM1-1 培养液。CM1-1 培养液:90%DMEM-H+10%FBS。DMEM-H:DMEM 高糖培养液,含谷氨酰胺,含丙酮酸钠。
复苏步骤:①新制 100mm 平皿 1 个,含 12mL 上述培养液;②冻存管从液氮或-80℃中取出,37℃水浴 1~2min,待完全溶解后尽快移入 安全柜复苏;③用无菌吸管吸取溶解液打入新制平皿中,顺时针摇匀;④放入(37℃,5%CO2)培养箱中,过夜换液,2-4 天长满。
传代/冻存:将旧培养液吸除,PBS 清洗两遍后,加入 6mL(/100mm 皿)胰酶,在显微镜下观察,期间禁止摇晃培养皿,细胞刚有脱落 时,则吸除大部分胰酶,留约 0.5mL,移至培养箱消化,约 2min 取出。传代用 12mL CM1-1 培养液终止消化,轻轻吹打均匀细胞,后 可分 3~6 皿培养;冻存则用 6mL 冻存液(90%FBS+10%DMSO)终止消化,吹打均匀,分为 6 支冻存管,用程序降温盒于-80℃冻存。
复苏质量记录:根据复苏要求,对以上细胞株进行复苏,记录结果如下:
项目 | 质量标准 | 复苏记录 |
复活性: | 12h 贴壁,70h 长满 80% | 过夜 18h 后观察贴壁,43h 密度达 80% |
细胞形态: | 贴壁,上皮细胞样 | CM1-1 培养液中,贴壁,上皮细胞样,长梭形、圆形 |
附图: | ![]() |
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结论: | 复活性好,且细胞形态无异常,合格 |
质检员/日期: 司马重园 2019.7.16 审核员签字:杨晴
关于此细胞株更多信息可在 BNCC 官网查询:www.bncc.org.cn.或发电子邮件至技术指导邮 箱咨询 tech@bncc.org.cn。
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