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显微分光光度术

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芊芊落英 2021-01-28 14:47 评论( 0 ) 浏览( 255 )

显微分光光度术是基于细胞内不同化学物质对投射光有选择性吸收并吸收不同量的光以反映物质的性质和含量,故又称细胞吸收光度术。其基本原理是依据朗伯-比耳吸收定律。Lambert-Beer二人认为,一组平行光通过某种分布均匀的物质时被选择性吸收,光能吸收值(E)与受照射物质的厚度(d)及浓度(c)成正比关系,即E=K·d·c,式中K为某物质在特定波长下的克分子吸收系数。再根据浓度和体积定义,从上述等式推导出物质含量(m)与光能吸收值得关系式。即m=E·B/K,式中B为测量面积或直径。由于K为常数且难以计算,在实际应用中常采用相对质量(m·K)概念,用任意单位表示其量,即m·K=E·B。在显微分光光度术中,只要测出E和B,就可由计算机给出相对含量。

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