北纳生物-河南省工业微生物菌种工程技术研究中心

炭疽芽孢杆菌的微生物学检查

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致你i 2021-09-15 20:57 评论( 0 ) 浏览( 167 )

细菌学检查

1、涂片镜检

病料涂片以碱性美蓝、瑞氏染色或姬姆萨染色法染色镜检,如发现有典型的炭疽杆菌,即可作出初步诊断,材料不新鲜时菌体易消失。

2、分离培养

取病料接种于普通琼脂或血液琼脂,37℃培养18~24h,观察有无典型的炭疽杆菌菌落,同时涂片作革兰染色镜检。

3、动物感染试验

将被检病料或培养物用生理盐水制成1:5乳悬液,皮下注射小鼠0.1mL或豚鼠、家兔0.2~0.3mL。动物通常于注射后24~36h(小鼠)或2~3d(豚鼠、家兔)死于败血症,剖检可见注射部位皮下呈胶样浸润及脾脏肿大等病理变化。取血液、脏器涂片镜检,当发现竹节状有荚膜的大肠杆菌时,即可诊断。

血清学检查

1、Ascoli沉淀反应

由Ascoli于1902年创立,是用加热抽提待检炭疽菌体多糖抗原与已知抗体进行的沉淀试验。在一支小玻璃管内把疑为炭疽病死亡动物尸体组织的浸出液与特异性炭疽沉淀素血清重叠,如在二液接触面产生灰白色沉淀环,即可诊断。本法适用于各种病料、皮张,甚至严重腐败污染的尸体材料,方法简便,反应清晰,故应用广泛。

2、间接血凝试验

此法是将炭疽抗血清吸附于炭粉或乳胶上,制成炭粉诊断或乳胶诊断血清。然后采用玻片凝集试验的方法,检查被检样品中是否含有炭疽芽孢。若被检样品每毫升含炭疽芽孢7.8万个以上,可判为阳性反应。

3、协同凝集试验

此法可快速检测炭疽杆菌或病料中的可溶性抗原。将炭疽标本的高压灭菌滤液滴于玻片上,加1滴含阳性血清的协同试验试剂,混匀后,于2min内呈现肉眼可见凝集者,即为阳性反应。此外,还可应用串珠荧光抗体法、琼脂扩散试验等检测从动物体内分离出的细菌;也可应用酶标葡萄球菌A蛋白间接染色法和荧光抗体间接染色法等,检测动物体内的炭疽荚膜抗体进行诊断。 

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