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牛胚气管细胞的培养方法

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致你i 2021-11-12 08:55 评论( 0 ) 浏览( 100 )

牛胚气管细胞的培养方法如下: 培养基:90%RPMI-1640+10%FBS 传代方法:将旧培养液吸除,PBS清洗两遍后,加入6mL(/100mm皿)胰酶,在显微镜下观察,期间禁止摇晃培养皿,细胞刚有脱落时,则吸除大部分胰酶,留约0.5mL,移至培养箱消化,约5min取出。传代用12mL CM2-1培养液终止消化,轻轻吹打均匀细胞,后可分3~6皿培养; 生长条件:37℃,5%CO2,CM2-1培养液。CM2-1培养液:90%RPMI-1640+10%FBS。RPMI-1640:1640培养基,含谷氨酰胺。 存储条件:冻存则用6mL冻存液(90%FBS+10%DMSO)终止消化,吹打均匀,分为6支冻存管,用程序降温盒于-80℃冻存,过夜转移至液氮中保存。

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