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牙周膜成纤维细胞的培养方法

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致你i 2021-11-18 08:45 评论( 0 ) 浏览( 118 )

牙周膜成纤维细胞是牙周膜组织中数量最多、功能上最重要的细胞。它能不断合成与降解胶原,维持牙周膜中胶原的更新与重建,以及通过分泌多种细胞活性因子刺激成骨细胞和破骨细胞完成牙周组织的修复与再生。人牙周膜成纤维细胞(PLFs)作为牙周膜Chemicalbook的主体细胞,是牙周膜主要的间质细胞,它不仅具有合成胶原、基质、弹力纤维和糖蛋白的功能,还有吸收胶原吞噬异物的能力,还参与了牙周组织的病变、修复及再生过程。利用人牙周膜成纤维细胞建立体外细胞系已成为国内外学者研究正畸牙移动的重要手段。该细胞的培养方法如下: 传代方法:将旧培养液吸除,PBS清洗两遍后,加入6mL(/100mm皿)胰酶,在显微镜下观察,期间禁止摇晃培养皿,细胞刚有脱落时,则吸除大部分胰酶,留约0.5mL,移至培养箱消化,约3min取出。传代用12mL CM1-1培养液终止消化,轻轻吹打均匀细胞,后可分4~8皿培养; 生长条件:37℃,5%CO2,CM1-1培养液。CM1-1培养液:90%DMEM-H+10%FBS。DMEM-H:DMEM高糖培养液,含谷氨酰胺,含丙酮酸钠。 存储条件:冻存则用6mL冻存液(90%FBS+10%DMSO)终止消化,吹打均匀,分为6支冻存管,用程序降温盒于-80℃冻存,过夜转移至液氮中保存。

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