北纳生物-河南省工业微生物菌种工程技术研究中心

大鼠肺泡巨噬细胞的培养方法

致你i-会员头像-www.bncc.org.cn北纳生物
致你i 2021-11-21 11:38 评论( 0 ) 浏览( 104 )

大鼠肺泡巨噬细胞是一种终末分化细胞,属于不增殖细胞群,不能增殖和传代,只能进行原代培养且存活时间较短;建议收到细胞后尽快进行相关实验,此细胞不建议传代。大鼠肺泡巨噬细胞采用机械研磨结合差速贴壁法制备而来,细胞总量约为5×105cells/瓶;细胞经CD68免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。该细胞的培养方法如下: 传代方法:将培养好的悬浮细胞轻轻吹打均匀,分配至2~3个新鲜培养液皿中,轻轻摇匀后放入培养箱培养; 生长条件:37℃,5%CO2,CM28-1培养液。CM28-1培养液:80%F-12K+20%FBS。F-12K:F-12K培养液。 生长特性:刚复苏时细胞悬浮生长,且生长缓慢,高密度时会有少量松散贴壁。 存储条件:将悬浮细胞转移至离心管中,(110g,3min)离心,离心完成后用3mL冻存液(90%FBS+10%DMSO)重悬细胞,吹打均匀,分为3支冻存管,用程序降温盒于-80℃冻存,过夜转移至液氮中保存。

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