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人的肾小球内皮细胞的培养方法

致你i-会员头像-www.bncc.org.cn北纳生物
致你i 2021-12-01 07:59 评论( 0 ) 浏览( 87 )

肾小球内皮细胞是肾小球固有细胞之一,也是构成肾单位的重要组成部分。肾小球内皮细胞能够调节肾小球滤过功能,是滤过屏障内壁的重要组成部分,与肾小球的病理生理过程相关。肾小球是包裹在肾小囊内的一团卷曲的毛细血管,肾小球结构复杂而独特,其固有细胞包括肾小球内皮细胞、系膜细胞和上皮细胞,它们相互之间结构与功能联系密切,相互关联。在大鼠肾小球中,内皮细胞、系膜细胞和上皮细胞3种细胞的数量比为3:2:1。 该细胞的培养方法如下:传代方法:将旧培养液吸除,PBS清洗两遍后,加入6mL(/100mm皿)胰酶,在显微镜下观察,期间禁止摇晃培养皿,细胞刚有脱落时,则吸除大部分胰酶,留约0.5mL,移至培养箱消化,约2min取出。传代用12mL CM1-1培养液终止消化,轻轻吹打均匀细胞,后可分3~6皿培养; 生长条件:37℃,5%CO2,CM1-1培养液。CM1-1培养液:90%DMEM-H+10%FBS。DMEM-H:DMEM高糖培养液,含谷氨酰胺,含丙酮酸钠。 存储条件:冻存则用6mL冻存液(90%FBS+10%DMSO)终止消化,吹打均匀,分为6支冻存管,用程序降温盒于-80℃冻存,过夜转移至液氮中保存。

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