北纳生物-河南省工业微生物菌种工程技术研究中心

猪睾丸间质细胞的培养方法

致你i-会员头像-www.bncc.org.cn北纳生物
致你i 2021-12-01 08:00 评论( 0 ) 浏览( 109 )

猪睾丸间质细胞成群分布在曲精小管之间,胞体呈圆形,椭圆形或不规则形,胞体较大,直径约20μm,胞质呈嗜酸性,细胞核呈圆形或卵圆形,常位于中央,染色较淡,有1~2个核仁线粒体多,呈管嵴状,无分泌颗粒。 猪睾丸间质细胞的培养方法如下:传代方法:将旧培养液吸除,PBS清洗两遍后,加入6mL(/100mm皿)胰酶,在显微镜下观察,期间禁止摇晃培养皿,细胞刚有脱落时,则吸除大部分胰酶,留约0.5mL,移至培养箱消化,约2min取出。传代用12mL CM1-1培养液终止消化,轻轻吹打均匀细胞,后可分4~8皿培养; 生长条件:37℃,5%CO2,CM1-1培养液。CM1-1培养液:90%DMEM-H+10%FBS。DMEM-H:DMEM高糖培养液,含谷氨酰胺,含丙酮酸钠。 存储条件:冻存则用6mL冻存液(90%FBS+10%DMSO)终止消化,吹打均匀,分为6支冻存管,用程序降温盒于-80℃冻存,过夜转移至液氮中保存。

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