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人小脑颗粒细胞的培养方法

致你i-会员头像-www.bncc.org.cn北纳生物
致你i 2021-12-03 08:25 评论( 0 ) 浏览( 77 )

人小脑颗粒细胞分离自小脑皮层组织;神经元是神经系统最基本的结构与功能单位,小脑颗粒神经元是体积较小的神经元,直径约10μm,在中枢神经系统中含量非常丰富,近乎神经元数量的一半。由于小脑神经元的生长、分化和大脑皮层神经元相似,而且数量多、便于取材,因此小脑颗粒神经元是研究神经元生长发育、神经轴突再生及神经疾病发生机制和临床神经药理的重要手段。 人小脑颗粒细胞的培养方法如下:传代方法:将旧培养液吸除,PBS清洗两遍后,加入6mL(/100mm皿)胰酶,在显微镜下观察,期间禁止摇晃培养皿,细胞刚有脱落时,则吸除大部分胰酶,留约0.5mL,移至培养箱消化,约3min取出。传代用12mL CM1-1培养液终止消化,轻轻吹打均匀细胞,后可分3~6皿培养; 生长条件:37℃,5%CO2,CM1-1培养液。CM1-1培养液:90%DMEM-H+10%FBS。DMEM-H:DMEM高糖培养液,含谷氨酰胺,含丙酮酸钠。 存储条件:冻存则用6mL冻存液(90%FBS+10%DMSO)终止消化,吹打均匀,分为6支冻存管,用程序降温盒于-80℃冻存,过夜转移至液氮中保存。

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