流感病毒核酸内切酶作用

cRNA是合成子代病毒基因组的模板，可在感染的宿主细胞内发现，它是病毒RNA的完全转录物。流感病毒的初始转包括引物RNA的切割、合成启始、链的延长和终止等几个过程，由病毒转录酶复合体来完成。流感病毒复制时可产生两种基因转录物：一种是A(+)cRNA，其功能相当于mRNA；另一种是A(－)cRNA，是病毒复制时产生vRNA的模板。病毒RNA在细胞内最先转录出mRNA(+)cRNA，这一过程称初始转录。一般的核酸酶切割后产生的3’端带有磷酸，而流感病毒的核酸内切酶切割后可产生3’端OH基，因此切下的寡核苷酸不需要去磷酸化即可直接作引物。子代病毒RNA分子的产生称为二级转录，这一过程是用A(－)cRNA作模板合成vRNA。流感病毒与其它RNA病毒(如小RNA病毒)不同，它不能在去核的细胞内复制，而且紫外线照射、放线菌素D或丝裂酶素C都可以阻断病毒的增殖。上述药物只能在RNA合成之前，即感染后前2小时之内有此作用。转录时由于病毒蛋白质的参与，能通过模板上的PolyU区到达5’末端。病毒核酸酶PB2结合到宿主mRNA的5’端并切下10～13个核苷酸，这一序列带有帽子结构，可直接作为引物。流感病毒核酸内切酶作用的发挥要求帽子上有m7G，其合适的切割位点在嘌呤的3’端，并且距离是10～13个核苷酸，最适切割位点是腺嘌呤核苷的3’端。引物加上后，PB1以病毒RNA为模板催化合成的起始和链和延伸。加上去的第一个核苷酸是G，它与病毒RNA3’端的第二个核苷酸互补，当链延伸到11－15个核苷酸长度时，引物从PB2上释放下来，当链延伸到距模板5’端15～22个核苷酸处时遇到寡聚U序列，以此为模板合成PolyA尾后使链的延长终止。流感病毒mRNA的合成在无病毒蛋白质合成的情况下即可进行，而(A)(一)cRNA不同，必须在有功能性病毒蛋白合成后才能进行。