北纳生物-河南省工业微生物菌种工程技术研究中心

食品中克罗诺杆菌属的检验方法

发布时间:2021-10-21 16:28 作者:北纳生物编辑-陈丹

1 范围

本标准规定了食品中克罗诺杆菌属(Cronobacter)的检验方法。

本标准适用于婴幼儿配方食品、乳和乳制品及其原料中克罗诺杆菌属的检验。

2 设备和材料

除微生物实验室常规灭菌及培养设备外,其他设备和材料如下:

恒温培养箱:25℃±1℃,36℃±1℃,44℃±0.5℃,冰箱:2℃~5℃,恒温水浴箱:44℃±0.5℃,天平:感量0.1g,均质器,振荡器,无菌吸管:1mL(具0.01mL刻度)、10mL(具0.1mL刻度)或微量移液器及吸头,无菌锥形瓶:容量100mL、200mL、2000mL,无菌培养皿:直径90mm,pH计或pH比色管或精密pH试纸,全自动微生物生化鉴定系统。

3 培养基和试剂

缓冲蛋白胨水,改良月桂基硫酸盐胰蛋白胨肉汤-万古霉素,阪崎肠杆菌显色培养基,胰蛋白胨大豆琼脂,生化鉴定试剂盒,氧化酶试剂, L-赖氨酸脱羧酶培养基, L-鸟氨酸脱羧酶培养基, L-精氨酸双水解酶培养基,糖类发酵培养基,西蒙氏柠檬酸盐培养基:见A.9。

4 检验程序

克罗诺杆菌属检验程序见图1

克罗诺杆菌属检验程序|北纳生物

图1 克罗诺杆菌属检验程序

5 操作步骤

5.1 前增菌和增菌

取检样100g(mL)置灭菌锥形瓶中,加入900mL已预热至44℃的缓冲蛋白胨水,用手缓缓地摇动至充分溶解,36℃±1℃培养18h±2h。移取1mL转种于10mLmLST-Vm肉汤,44℃±0.5℃培养24h±2h。

5.2 分离

5.2.1 轻轻混匀mLST-Vm肉汤培养物

各取增菌培养物1环,分别划线接种于两个阪崎肠杆菌显色培养基平板,显色培养基须符合GB4789.28的要求,36℃±1℃培养24h±2h,或按培养基要求条件培养。

5.2.2培养

 挑取至少5个可疑菌落,不足5个时挑取全部可疑菌落,划线接种于TSA平板。25℃±1℃培养48h±4h。

5.3 鉴定

自TSA平板上直接挑取黄色可疑菌落,进行生化鉴定。克罗诺杆菌属的主要生化特征见表1。可选择生化鉴定试剂盒或全自动微生物生化鉴定系统。

克罗诺杆菌属的主要生化特征|北纳生物

表1 克罗诺杆菌属的主要生化特征

6 结果与报告

综合菌落形态和生化特征,报告每100g(mL)样品中检出或未检出克罗诺杆菌属。

相关链接:克罗诺杆菌属阪崎肠杆菌万古霉素蛋白陈柠檬酸盐北纳生物

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