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基本信息
资源编号 BNCC272665
资源名称 猪鼻甲粘膜成纤维细胞
种属 PT-K75
类型 贴壁生长
形态 CM1-1培养液中,贴壁,成纤维细胞样
分离基物 PT-K75细胞系是来自两个新生仔猪的鼻甲粘膜
提供形式 复苏形式:T25培养瓶1瓶;或者冻存形式:2ml冻存管2支,干冰费另计。
安全等级 1
模式菌株 未知
应用领域 细胞用于猪巨细胞病毒(CMV)的传播co-cultivation 1:1与猪(CMV)感染的细胞。_x000d_
培养方法
传代方法 将旧培养液吸除,PBS清洗两遍后,加入6mL(/100mm皿)胰酶,在显微镜下观察,期间禁止摇晃培养皿,细胞刚有脱落时,则吸除大部分胰酶,留约0.5mL,移至培养箱消化,约2min取出。传代用12mL CM1-1培养液终止消化,轻轻吹打均匀细胞,后可分2~4皿培养;
生长条件 37℃,5%CO2,CM1-1培养液。CM1-1培养液:90%DMEM-H+10%FBS。DMEM-H:DMEM高糖培养液,含谷氨酰胺,含丙酮酸钠。
生长特性 1:3传代,细胞长到80%的密度,大概需要一周的时间,细胞长的慢。伸展的比较大,细胞量少
存储条件 冻存则用6mL冻存液(90%FBS+10%DMSO)终止消化,吹打均匀,分为6支冻存管,用程序降温盒于-80℃冻存,过夜转移至液氮中保存。

产品详情

PT-K75 猪鼻甲粘膜成纤维细胞 贴壁,成纤维细胞样

编号: 272665

培养:37℃,5%CO2 CM1-1 培养液

产品形式: 2mL 冻存管 × 2 支、或 T25 × 1 瓶

安全等级: 一级,安全柜或超净台操作

收货须知:收货当天发现异常,请在 24 小时内及时联系客服,逾期视为收货良好;冻存管形式,收货后及时置于-80℃冰箱保存,若 长时间不使用,应过夜转移至液氮保藏;T25 形式,收货后先培养瓶原装置于培养箱静养 4h,然后再对细胞进行常规操作。复苏时每 管一次用完不得留存,复苏后传一代,即可正常使用。请严格按照本说明操作,否则造成细胞失活等情形,不予提供补发服务。

培养条件:37℃,5%CO2,CM1-1 培养液。CM1-1 培养液:90%DMEM-H+10%FBS。DMEM-H:DMEM 高糖培养液,含谷氨酰胺,含丙酮酸钠。

复苏步骤:①新制 100mm 平皿 1 个,含 12mL 上述培养液;②冻存管从液氮或-80℃中取出,37℃水浴 1~2min,待完全溶解后尽快移入 安全柜复苏;③用无菌吸管吸取溶解液打入新制平皿中,顺时针摇匀;④放入(37℃,5%CO2)培养箱中,过夜换液,4-6 天长满。

传代/冻存:将旧培养液吸除,PBS 清洗两遍后,加入 2mL(/100mm 皿/T25 瓶)胰酶(0.25%Trypsin+0.02%EDTA),在显微镜下观察, 期间禁止摇晃培养皿,细胞刚有脱落时,吸除大部分胰酶,留约 0.5mL,移至培养箱消化,约 1.5min 取出。传代用 6mL CM1-1 培养液 终止消化,轻轻吹打均匀细胞,后可分 3~6 皿培养;冻存则用 3mL 冻存液(90%FBS+10%DMSO)终止消化,吹打均匀,分为 3 支冻存管, 用程序降温盒于-80℃冻存。

复苏质量记录:根据复苏要求,对以上细胞株进行复苏,记录结果如下:

项目 质量标准 复苏记录
复活性: 18h 贴壁,96h 长满 80% 过夜 18h 观察贴壁,90h 密度达 80%
细胞形态: 贴壁,成纤维细胞样 CM1-1 培养液中,贴壁,成纤维细胞样,菱形细长
附图:
结论: 复活性好,且细胞形态无异常,合格  

质检员/日期: 朱玥 2020.06.19 审核员签字:丁保敏

关于此细胞株更多信息可在 BNCC 官网查询:www.bncc.org.cn

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