小鼠心房肌细胞 BNCCBNCC288890 科研细胞|北纳生物

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小鼠心房肌细胞基本信息

培养基	DMEM-H完全培养基：90%DMEM-H+10%FBS
传代方法	复苏步骤：①冻存管从液氮或-80℃冰箱中取出放入PE手套中，迅速没入37℃水浴锅，摇晃冻存管加速溶解，以1min内全部溶解为宜；②在超净台中将溶解好的细胞液加入到装有9mL完全培养基的离心管内，1000-1200rpm离心5min，弃去上清液，用1-2mL完全培养基重悬细胞。③将细胞悬液加入到含有5-6mL完全培养基的T25瓶中，放入培养箱培养。细胞传代：①将旧培养液吸除，PBS清洗两遍后，加入1-2mL胰酶（0.25%Trypsin+0.02%EDTA）；②镜下观察消化情况，在细胞边缘缩小，贴壁松动时（可用吸管吸起些许胰酶轻轻吹打细胞层某处，肉眼可见细胞层脱落，即消化完成，否则继续消化），直接吸掉胰酶，加入5-6mL完全培养基，轻轻吹打细胞层，把细胞层吹落，吹散。③将细胞悬液按1:2比例分到新的T25瓶中，添加适当的完全培养基，把细胞悬液打匀，于培养箱中培养。；④注意培养基pH值变化和细胞密度，定期换液（每周2-3次），待细胞密度达到80%-90%时，重复传代操作或者冻存。
生长条件	培养温度37℃；气体环境5%CO2+95%空气；
生长特性	贴壁生长
存储条件	液氮
安全等级	1
形态	成纤维细胞样，长梭形，边缘不规则，单层贴壁生长，背景干净，不产色素，无空泡
分离基物	心肌细胞；SV40转化
共享方式	公益性共享

HL-1 小鼠心房肌细胞

贴壁，成纤维细胞样

编号： 288890

产品形式： 2mL 冻存管 × 2 支、或 T25 × 1 瓶

安全等级： 一级，安全柜或超净台操作

收货须知：收货当天发现异常，请在 24 小时内及时联系客服，逾期视为收货良好；冻存管形式，收货后及时置于-80℃冰箱保存，若长时间不使用，应过夜转移至液氮保藏；T25 形式，收货后先培养瓶原装置于培养箱静养 4h，然后再对细胞进行常规操作。复苏时每管一次用完不得留存，复苏后传一代，即可正常使用。请严格按照本说明操作，否则造成细胞失活等情形，不予提供补发服务。

培养条件：37℃，5%CO2，CM1-1 培养液。CM1-1 培养液：90%DMEM-H+10%FBS。DMEM-H：DMEM 高糖培养液，含谷氨酰胺，含丙酮酸钠。

复苏步骤：

①新制 100mm 平皿 1 个，含 12mL 上述培养液；

②冻存管从液氮或-80℃中取出，37℃水浴 1~2min,待完全溶解后尽快移入安全柜复苏；

③用无菌吸管吸取溶解液打入新制平皿中，顺时针摇匀；④放入（37℃，5%CO2）培养箱中，过夜换液，2-4 天长满。

传代/冻存：将旧培养液吸除，PBS 清洗两遍后，加入 2mL（/100mm 皿/T25 瓶）胰酶（0.25%Trypsin+0.02%EDTA），在显微镜下观察，期间禁止摇晃培养皿，细胞刚有脱落时，吸除大部分胰酶，留约 0.5mL，移至培养箱消化，约 2min 取出。传代用 6mL CM1-1 培养液终止消化，轻轻吹打均匀细胞，后可分 3~6 皿培养；冻存则用 3mL 冻存液（90%FBS+10%DMSO）终止消化，吹打均匀，分为 3 支冻存管，用程序降温盒于-80℃冻存。

复苏质量记录：根据复苏要求，对以上细胞株进行复苏，记录结果如下：

项目	质量标准	复苏记录
复活性：	18h 贴壁，70h 长满 80%	过夜 18h 后观察贴壁，66h 密度达 70%
细胞形态：	贴壁，成纤维细胞样	CM1-1 培养液中，贴壁，成纤维细胞样
附图
结论	复活性好，且细胞形态无异常，合格

质检员/日期：丁保敏 2020.07.29 审核员签字：朱玥

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